生物成像分析平台

一、平台介绍

        中心实验室生物成像平台以科研服务为宗旨，通过电子显微技术和光学显微技术,致力于生物学对象从宏观、微观到纳米尺度的高分辨率成像,揭示生物体超微组织结构,阐明生物体各种生理功能,服务于生命科学前沿研究。目前平台拥有透射电子显微镜、扫描电子显微镜、激光共聚焦显微镜等多台(套)大型仪器设备,可以满足光镜和电镜的数据采集。平台拥有扫描电镜、透射电镜样品前处理的技术能力,包括超薄切片技术和负染等。平台现有专业技术人员2名,具有丰富的仪器操作和实验技术经验。

二、主要特色技术

1、扫描电镜样品前处理技术

       采用临界点干燥法，利用物质在临界状态时，其表面张力等于零的特性，使样品的液体完全汽化，并以气体方式排掉，来达到完全干燥的目的。

图1 扫描电镜样品前处理技术

2、透射电镜样品前处理技术

       利用戊二醛、四氧化锇等固定液,阻止细胞自溶、稳定细胞的化学成分和超微结构。样品经脱水、渗透、包埋,形成树脂硬块,利用超薄切片设备切成<100nm的切片,经染色后进行观察；负染技术用高密度的重金属盐染料(如磷钨酸和醋酸双氧铀等)对样品进行染色,使整个碳膜都铺上一层重金属盐,沉积在样品表面的染料比周围的少,因此在电子束照射下呈现白色,而染料多的背景对电子散射性强，透过电子少则呈现暗色。

图2 透射电镜样品前处理技术

三、仪器设备

        生物成像平台主要仪器包括透射电子显微镜（HITACHI HT7700）、扫描电子显微镜（HITACHI SU3500）、激光共聚焦显微镜（Leica TCS SP8）、正置荧光显微镜（Leica DM6000B）、荧光微分干涉倒置显微镜（Leica DMI6000B）、体式荧光显微镜（Leica M205FA）、超速流式细胞分选系统（Beckman Coulter MoFlo XDP）、荧光定量PCR仪（Applied Biosystems QuantStudio 7 Flex）等。